Uobičajeni problemi i rješenja u procesu sinteze peptida uključuju sljedeće aspekte:
Sadržaj peptida: Sadržaj peptida odnosi se na postotak peptidnih tvari u uzorku u odnosu na nepeptidne tvari. U peptidne proizvode, osim samog peptida, uključene su i komponente koje nisu soli uvedene tijekom procesa proizvodnje, kao što su voda, apsorbirana otapala, koordinacijski ioni i soli.
Kemijska stabilnost:
Reakcija deamidacije: Asn/Gln ostaci se lako hidroliziraju u Asp/Glu.
Hidroliza: Peptidne veze u peptidima lako se prekidaju hidrolizom, posebno one nastale sudjelovanjem Asp, posebno Asp Pro i Asp Gly peptidne veze.
Reakcija racemizacije: Svi aminokiselinski ostaci osim Gly imaju kiralne alfa ugljikove atome i skloni su reakciji racemizacije pod alkalnom katalizom. Asp ostaci su najskloniji reakcijama racemizacije.
- razgradnja eliminacijom: Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr i drugi ostaci mogu se razgraditi kroz - eliminaciju, koja će se vjerojatnije dogoditi pri alkalnom pH i na koju utječu temperatura i metalni ioni
Fizička stabilnost:
Denaturacija, adsorpcija, agregacija ili taloženje: denaturacija peptida obično je povezana s uništavanjem tercijarnih i sekundarnih struktura. U denaturiranom stanju peptidi su skloniji kemijskim reakcijama i njihova se aktivnost teško obnavlja. Intermedijer nastao tijekom procesa denaturacije ima nisku topljivost i sklon je agregaciji i taloženju
očuvanje:
Najbolji uvjeti skladištenja: Peptidi se općenito pohranjuju u obliku zamrzavanjem osušenog praha, koji je vrlo stabilan na -20 stupnjeva, posebno nakon sušenja zamrzavanjem i pohranjenih u sušilici na -20 stupnjeva. Većina peptida može se pohraniti na ovoj temperaturi nekoliko godina bez promjene. Kako bi se smanjio utjecaj vlage, liofilizirane peptide treba vratiti na sobnu temperaturu u suhim uvjetima prije izlaganja zraku.
Pakiranje: Hesheng Biotechnology preporučuje mala pakiranja kako bi se izbjegli ponovljeni ciklusi smrzavanja i odmrzavanja, smanjio broj otvaranja i zatvaranja spremnika, čime se smanjuju mogućnosti nepravilnog rukovanja ili bakterijske kontaminacije i osigurava stabilnost peptida
Ispitivanje čistoće:
Jamstvo čistoće: Svi isporučeni peptidi postigli su potrebnu čistoću, a peptidi koji ne zadovoljavaju standard bit će odbačeni. Rezultati HPLC i MS detekcije mogu potvrditi čistoću i molekularnu težinu peptida, dok prikazuju glavne nečistoće.
Ostale metode detekcije, poput analize aminokiselina ili elementarne analize, mogu potvrditi sastav aminokiselina peptida kao dopunski način potvrde peptida
Tehnologija sinteze:
Sinteza peptida u čvrstoj fazi: Sinteza peptida u čvrstoj fazi ne zahtijeva pročišćavanje međuproizvoda, što omogućuje kontinuirane procese sinteze i postavlja temelje za automatizaciju sinteze peptida. Na temelju Fmoc kemijske sinteze, ciljni peptid je sintetiziran kovalentnim povezivanjem karboksilne skupine C-terminalne aminokiseline s netopivom polimernom smolom, a zatim počevši od amino skupine aminokiseline
Gornji sadržaj sažima uobičajene probleme i protumjere u sintezi peptida, pokrivajući više aspekata kao što su kemijska stabilnost, fizička stabilnost, uvjeti skladištenja, ispitivanje čistoće itd.