Peptidna nukleinska kiselina (PNA) je umjetna molekula nukleinske kiseline koja ima razne prednosti u odnosu na prirodnu DNA i RNA, poput visoke selektivnosti, snažnog afiniteta i stabilnosti. Sinteza čvrste faze jedna je od glavnih metoda za sintezu PNA, sa sljedećim specifičnim koracima:
Odabir odgovarajućih zaštitnih skupina: Reakcija zaštitnih skupina s amino ili karboksilnim skupinama na PNA prekursoru kako bi se formirali esteri ili amidi zaštitnih skupina.
Povezivanje s polimernom smolom: PNA prekursor modificiran zaštitnom skupinom povezan je s polimernom smolom, obično pomoću polimerne smole s duljinom ugljikovog lanca od 20-30 aminokiselinskih ostataka.
Ponavljanje ciklusa sinteze: uključujući uklanjanje N-terminalne zaštitne skupine; Dodajte sljedeću aminokiselinsku jedinicu; Ponovno izvršite zaštitu N-terminala.
Uklanjanje zaštite i odvajanje: Nakon sinteze, PNA peptidni lanac se odvaja od polimerne smole alkalnom obradom ili kiselinskom hidrolizom, a sve zaštitne skupine se uklanjaju kako bi se dobio PNA proizvod.
Ova metoda može učinkovito sintetizirati PNA molekule duljine do nekoliko stotina nukleotida, a sintetizirani proizvodi imaju visoku čistoću, što ih čini prikladnima za proizvodnju velikih razmjera
Međutim, u praktičnim primjenama, čistoća PNA agregirane općim automatskim sintesajzerima nije idealna HiPep Research Institute je razvio novu sintetsku metodu koja može dati PNA proizvode visoke čistoće. Ova metoda rješava neke probleme u tradicionalnoj sintezi, kao što su skupe cijene komponenti, lako steričko ometanje zaštitnih skupina i značajan utjecaj čistoće monomera na biološku aktivnost ciljne PNA. Standardni raspon sinteze je 10-15 baza, a za sintezu više od 16 baza, to je posebna narudžba koja zahtijeva poseban kontakt s dobavljačem
Osim toga, sinteza PNA također uključuje različite metode modifikacije, kao što je modifikacija fluorescencije, modifikacija biotina, modifikacija peptida, glikozilacija i modifikacija DNA, kako bi se zadovoljile različite potrebe istraživanja. Stoga je vrlo važno odabrati odgovarajuće metode i tehnike sinteze na temelju specifične primjene scenarija i zahtjeva.
