Biotinski peptidi

Što su biotinilirani peptidi?

Biotinilirani peptidi su peptidi koji su modificirani tako da uključuju dio biotina. Ova modifikacija iskorištava interakciju visokog-afiniteta između biotina i avidina ili streptavidina, koji se široko koristi u biološkim i biokemijskim primjenama. Molekula biotina je mala, stabilna i ne mijenja značajno strukturu ili funkciju peptida, dok omogućuje vrlo učinkovito hvatanje ili detekciju putem sustava temeljenih na avidinu-.

 

Kemijska modifikacija
Biotin se obično uvodi putem NHS-biotinskog (N-hidroksisukcinimid biotin) reagensa, koji reagira s primarnim aminskim skupinama koje se nalaze na N-kraju peptida ili ostacima lizina, tvoreći stabilnu amidnu vezu.

生物素（Biotin） 肽（Peptid）

COOH NH2

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（Aktivacija） → 缩合（Spajanje）

↓ ↓

Biotin-CONH-peptid

 

Interakcija afiniteta
Biotinilirani peptid može se snažno vezati (Kd ~10⁻¹5 M) za avidin ili streptavidin, što ga čini idealnim za upotrebu u testovima koji zahtijevaju precizno otkrivanje, hvatanje ili imobilizaciju.

Slučajevi sinteze biotiniliranih peptida

Peptidna sekvenca: Biotin-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Duljina: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Peptidna sekvenca: biotin-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Duljina: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Primjena biotiniliranih peptida

Biotinilirani peptidi svestrani su alati u istraživanju i industriji, sa širokim rasponom primjena, uključujući:

Pročišćavanje afiniteta

Koristi se za pročišćavanje veznih partnera kao što su proteini, protutijela ili nukleinske kiseline imobilizacijom biotiniliranog peptida na streptavidinskim kuglicama.

ELISA i Western Blotting

Biotinilirani peptidi djeluju kao sonde za otkrivanje specifičnih interakcija kada su povezani s avidin-HRP ili avidin-fluorescentnim oznakama.

Površinska plazmonska rezonancija (SPR)

Koristi se za imobilizaciju peptida na biosenzorskim čipovima za studije interakcija.

Otkriće lijeka

Probir kandidata za lijekove analizom njihovog vezanja na ciljeve biotiniliranih peptida.

Imunologija

Biotinilirani peptidi koriste se za mapiranje epitopa, proučavanje interakcija antigen-protutijela i izvođenje testova T-stanica.

Mapiranje epitopa za razvoj cjepiva

Prilagođeni biotinilirani peptid korišten je za identifikaciju antigenih epitopa virusnog proteina, što je pomoglo u dizajniranju kandidata za cjepivo.

Protein-Studije interakcija proteina

Biotinilirani peptidi imobilizirani na pločama obloženim-streptavidinom omogućili su proučavanje interakcija receptor-liganda, otkrivajući afinitete vezanja ključne za razvoj lijeka.

Optimizacija imunotestova

U dijagnostičkom testu, biotinilirani peptidi korišteni su kao antigeni za poboljšanje osjetljivosti i specifičnosti ELISA testa za otkrivanje biomarkera bolesti.

 

Reference

1. Green, NM (1975).Avidin i streptavidin.Biochemical Journal, 131 (3), 781-791.

2. Chaiet, L. i Wolf, FJ (1964).Svojstva streptavidina, biotin{0}}vežućeg proteina kojeg proizvodi Streptomyces.Arhiv za biokemiju i biofiziku, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, i Titus, G. (1994).Biotinilacija proteina u istraživanju i biotehnologiji.Analna biokemija, 218(1), 1-7.