Bok tamo! Kao dobavljača peptida iz kataloga, često me pitaju kako su ti peptidi formulirani za različite primjene. To je super zanimljiva tema i uzbuđen sam što mogu s vama podijeliti neke uvide.
Prvo, razgovarajmo o tome što su peptidi kataloga. Jednostavnim rječnikom rečeno, to su unaprijed napravljeni peptidi koji su dostupni u katalogu dobavljača. Ovi se peptidi koriste u širokom rasponu primjena, od istraživanja u biokemiji i farmakologiji do potencijalne terapeutske upotrebe.
Osnove formulacije
Formulacija peptida iz kataloga počinje s jasnim razumijevanjem krajnje upotrebe. Različite primjene zahtijevaju da peptidi budu u određenim oblicima. Na primjer, ako će se peptid koristiti u in vitro pokusu stanične kulture, mora biti u obliku koji je lako topiv u mediju stanične kulture. S druge strane, ako se radi o studijama in vivo na životinjama, čimbenici poput stabilnosti u fiziološkom okruženju tijela i bioraspoloživost postaju ključni.
Prvi korak u formuliranju peptida je njegova sintetizacija. Postoje različite metode za sintezu peptida, ali najčešća je sinteza peptida na čvrstoj fazi (SPPS). U SPPS-u je peptidni lanac izgrađen jednu po jednu aminokiselinu na čvrstoj podlozi. Ova metoda omogućuje preciznu kontrolu slijeda aminokiselina u peptidu.
Nakon što se peptid sintetizira, potrebno ga je pročistiti. Tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti (HPLC) široko je korištena tehnika za pročišćavanje peptida. Odvaja peptid od drugih nečistoća na temelju njihovih različitih interakcija sa stacionarnom i mobilnom fazom. Nakon pročišćavanja, čistoća peptida se provjerava korištenjem tehnika poput masene spektrometrije.
Formulacija za istraživačke primjene
U istraživanju se peptidi iz kataloga koriste u raznim testovima. Na primjer, u studijama vezanja receptora i liganda, peptidi se često koriste kao ligandi za proučavanje afiniteta vezanja i specifičnosti receptora. Da bi se formulirali peptidi za ova istraživanja, oni se obično otope u puferskoj otopini koja oponaša fiziološko okruženje. Ovo pomaže da se osigura da peptid zadrži svoju nativnu konformaciju i da može pravilno komunicirati s receptorom.
UzmimoEnterostatin (goveđi, pasji, svinjski)kao primjer. Enterostatin je peptid koji je proučavan zbog njegove uloge u regulaciji unosa hrane. Prilikom formuliranja enterostatina za istraživanje regulacije unosa hrane, obično se otapa u puferu na bazi fiziološke otopine. Ovaj pufer osigurava stabilno okruženje za peptid i kompatibilan je s in - vitro i in - vivo eksperimentima.
Druga uobičajena istraživačka primjena je proučavanje interakcija protein-protein. Peptidi se mogu dizajnirati tako da oponašaju specifične regije proteina i mogu se koristiti za ometanje ili pojačavanje tih interakcija. Za takve studije, peptidi moraju biti formulirani na način da mogu prodrijeti u stanice ako se interakcija događa unutar stanice. U nekim slučajevima, peptidi su konjugirani s peptidima koji prodiru u stanicu (CPP) kako bi im pomogli da prijeđu staničnu membranu.
Formulacija za terapeutske primjene
Kada je riječ o terapeutskim primjenama, formulacija kataloških peptida još je složenija. Terapeutski peptidi moraju biti stabilni u tijelu, imati dovoljno dug poluživot i moći doći do svojih ciljnih mjesta.
Jedan od izazova u formuliranju terapeutskih peptida je njihova osjetljivost na razgradnju enzimima u tijelu. Da bi se to prevladalo, koriste se razne strategije. Na primjer, peptidi se mogu modificirati dodavanjem kemijskih skupina koje ih štite od enzimske razgradnje. Drugi pristup je inkapsulacija peptida u nanočestice ili liposome. Ti nosači mogu zaštititi peptid od razgradnje i također poboljšati njegovu bioraspoloživost.
Beta - Amiloid (1 - 42), ljudskije peptid koji se povezuje s Alzheimerovom bolešću. U kontekstu razvoja potencijalnih terapija za Alzheimerovu bolest, formuliranje beta-amiloida (1 - 42) na način da se može koristiti za proučavanje mehanizma bolesti ili kao meta za razvoj lijekova je ključno. Može se formulirati u formulaciju sa sporim otpuštanjem, kao što je depo na bazi polimera, kako bi se osigurala kontinuirana opskrba peptidom tijekom dugog razdoblja.
Formulacija za dijagnostičke primjene
U dijagnostičkim primjenama peptidi se koriste kao biomarkeri ili kao sonde za otkrivanje specifičnih molekula. Na primjer, peptidi mogu biti dizajnirani da se vežu na specifična antitijela ili antigene. Kada se formuliraju peptidi za dijagnostiku, oni moraju biti u obliku koji je kompatibilan s dijagnostičkim testom.
Za imunotestove, peptidi se često konjugiraju s oznakama kao što su fluorescentne boje ili enzimi. Ove oznake omogućuju jednostavno otkrivanje interakcije peptid-cilja. Peptid - obilježeni konjugat se zatim formulira u puferu koji je prikladan za imunotest, obično puferu koji minimalizira nespecifično vezanje.
Protein kinaza C (19 - 36)može se koristiti kao dijagnostički marker za određene bolesti povezane s abnormalnom aktivnošću protein kinaze C. Prilikom formuliranja ovog peptida za dijagnostičku upotrebu, može se konjugirati s fluorescentnom oznakom i formulirati u pufer koji je optimiziran za specifičnu imunološku analizu koja se koristi.
Kontrola kvalitete u formulaciji peptida
Kontrola kvalitete bitan je dio formulacije peptida. Za svaku seriju peptida iz kataloga provode se stroge mjere kontrole kvalitete. To uključuje provjeru čistoće, identiteta i stabilnosti peptida.
Čistoća se obično određuje HPLC-om i masenom spektrometrijom. Identitet peptida potvrđuje se usporedbom njegove mase i sekvence s očekivanim vrijednostima. Ispitivanje stabilnosti je također važno, posebno za peptide koji će biti pohranjeni dulje vrijeme ili korišteni u dugotrajnim eksperimentima. Peptidi se testiraju u različitim uvjetima skladištenja (npr. različite temperature i pH vrijednosti) kako bi se osiguralo da ostaju stabilni.
Prilagođena formulacija
U našoj tvrtki također nudimo usluge prilagođene formulacije. Ako imate na umu određenu primjenu i trebate peptid koji treba formulirati na određeni način, možemo raditi s vama na razvoju prilagođene formulacije. To može uključivati prilagodbu sastava pufera, dodavanje specifičnih aditiva ili korištenje određenog sustava isporuke.
Bilo da ste istraživač koji traži peptid za svoj sljedeći eksperiment, farmaceutska tvrtka koja razvija novu terapiju ili dijagnostička tvrtka kojoj je potreban peptidni biomarker, mi imamo stručnost da formuliramo pravi peptid za vašu primjenu.
Ako ste zainteresirani saznati više o našem katalogu peptida ili našim uslugama prilagođene formulacije, ne ustručavajte se kontaktirati. Uvijek nam je drago popričati i razgovarati o tome kako možemo zadovoljiti vaše potrebe za peptidima.
Reference
- Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. i Walter, P. (2002.). Molekularna biologija stanice. Znanost o vijencu.
- Goodman, M. i Felix, AM (2003). Sinteza peptida i peptidomimetika. Methods in Enzymology, 369, 1 - 21.
- Langer, R. i Tirrell, DA (2004). Dizajniranje materijala za biologiju i medicinu. Priroda, 428(6982), 487 - 492.