Hibridoma fuzijski i selekcijski medij (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Opis proizvoda

产品名称

Naziv proizvoda

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridoma Fusion and Selection Medium (HAT)

货号 Kat. br

BRS-MED01

规格

Specifikacija

500 ml/瓶

500 ml / boca

产品组分

Komponente

DMEM 基础培养基:80% (体积比)

DMEM osnovni medij: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Uvezeni fetalni goveđi serum (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Kondicionirani medij: 10% (v/v)

Količina: 100 单位/mL

Penicilin: 100 U/mL

链霉素: 100 单位/mL

Streptomicin: 100 U/mL

次黄嘌呤 (hipoksantin): 100 uM

Hipoksantin: 100 µM

胸腺嘧啶核苷 (timidin): 16 uM

Timidin: 16 uM

氨基蝶呤 (Aminopterin): 0,4 uM

Aminopterin: 0,4 uM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Ostali dodaci: Razni citokini (dovoljna količina) i suplementi

保存条件

Uvjeti skladištenja

-20 stupnjeva 保存, 有效期 18 个月.

Čuvati na -20 stupnjeva. Rok trajanja: 18 mjeseci.

使用方法

Upute za uporabu

培养基融化:

37 stupnjeva 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Odmrzavanje medija:

Otopite medij u vodenoj kupelji na 37 stupnjeva. Obrišite vanjsku površinu 70% etanolom i stavite je u biološku sigurnosnu komoru za upotrebu.
Napomena: Pojava male količine bijelog flokulentnog materijala nakon odmrzavanja je normalna. Pustite medij stajati 3-5 minuta da se pahuljice slegnu na dno, zatim pažljivo prikupite supernatant za upotrebu.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 stupnjeva 5% CO2 培养箱静置培养.

Fuzija stanica i sjetva:

Provedite fuziju stanica koristeći fizikalne (elektrofuzija) ili kemijske (konvencionalni PEG) metode. Resuspendirajte spojene stanice izravno u ovom mediju odgovarajuće gustoće i volumena:

Elektrofuzija: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ stanica/jažici

PEG fuzija: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ stanica/jažici
Preporučeni volumen: 200 µL/jažici u ploči s 96 jažica.
Inkubirajte na 37 stupnjeva, 5% CO₂ za kulturu.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Srednja zamjena:

Dana 4–8 nakon -fuzije, izvršite djelomičnu ili potpunu zamjenu medija u skladu sa statusom rasta stanica.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Pregled klonova:

Kada stanični klonovi u jažicama dosegnu odgovarajuću veličinu, izvršite probir pozitivnog klona.

注意事项

Mjere predostrožnosti

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Ovaj proizvod je toksičan i namijenjen je samo za selekciju i kulturu stanica hibridoma. Ne smije se koristiti za kulturu živih životinja, u dijagnostičke svrhe ili u terapijske svrhe.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Ovaj proizvod je prikladan za selekciju i kulturu stanica hibridoma pomoću HGPRT selekcijskog sustava. Nije primjenjivo za TK ili druge selekcijske sustave. Ovaj medij se ne može koristiti za izravnu kulturu stanica s nedostatkom HGPRT- (npr. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液, pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Ovaj proizvod je sterilna otopina s pH 7,2–7,4. Sva rukovanja moraju se izvoditi u aseptičnim uvjetima.