Bok tamo! Kao dobavljač Tet - 213 stanica, jako sam uzbuđen što mogu s vama podijeliti kako izvršiti probir aptamera na Tet - 213 stanicama. Probir aptamera je cool proces koji nam može pomoći da pronađemo te posebne kratke sekvence nukleinskih kiselina, aptamere, koji se mogu vezati na specifične mete s visokim afinitetom i specifičnošću. A kada je riječ o Tet - 213 stanicama, to je potpuno novi svijet mogućnosti!
Prvo, razgovarajmo malo o Tet - 213 stanicama. Ove su stanice prilično jedinstvene i imaju različite primjene u biološkim istraživanjima. Više detalja o njima možete pronaći na našoj web straniciTet - 213.
Priprema za probir aptamera
Prije nego što uđemo u stvarni proces provjere, moramo pripremiti stvari. Prvi korak je ispravna kultura Tet - 213 stanica. Želite biti sigurni da su u zdravom stanju, da dobro rastu u pravom mediju kulture. Obično koristimo poseban medij koji osigurava sve hranjive tvari koje su tim stanicama potrebne za razvoj.
Zatim moramo pripremiti početnu biblioteku aptamera. Ova biblioteka je poput velikog bazena različitih sekvenci nukleinskih kiselina. Sadrži milijune ili čak milijarde različitih aptamera, svaki s jedinstvenim nizom. Upotrijebit ćemo ovu biblioteku za početak procesa provjere.
Proces skrininga
A sada, pređimo na sitnice probira aptamera na Tet - 213 stanicama. Najčešća metoda zove se sustavna evolucija liganda eksponencijalnim obogaćivanjem (SELEX). Evo kako to radi korak po korak:
Korak 1: Inkubacija
Uzimamo biblioteku aptamera i miješamo je sa Tet - 213 stanicama. Pustimo ih da se inkubiraju određeno vrijeme, obično nekoliko sati. Tijekom tog vremena, aptameri u biblioteci imat će priliku vezati se na površinu Tet - 213 stanica. Neki aptameri će se snažno vezati, dok se drugi uopće neće vezati.
Korak 2: Odvajanje
Nakon inkubacije potrebno je odvojiti aptamere koji su vezani za stanice od onih koji nisu. Postoji nekoliko načina za to. Jedna uobičajena metoda je korištenje centrifugiranja. Smjesu zavrtimo velikom brzinom, a stanice s vezanim aptamerima formirat će kuglicu na dnu epruvete, dok će nevezani aptameri ostati u supernatantu.
Korak 3: Eluacija
Nakon što smo odvojili vezane aptamere, moramo ih ukloniti sa stanica. To se zove elucija. Koristimo poseban pufer za kidanje veza između aptamera i stanica. Nakon eluiranja, imamo kolekciju aptamera koji imaju veći afinitet za Tet - 213 stanice u usporedbi s izvornom bibliotekom.
Korak 4: pojačanje
Broj aptamera koje dobijemo nakon eluiranja obično je prilično mali. Dakle, moramo ih pojačati. Koristimo tehniku koja se zove lančana reakcija polimeraze (PCR). PCR je poput stroja za fotokopiranje DNK ili RNK. Može napraviti milijune kopija aptamera u kratkom vremenu.
Korak 5: Ponavljanje
Proces provjere ne završava nakon jednog kruga. Obično nekoliko puta ponavljamo korake inkubacije, odvajanja, eluiranja i amplifikacije. Svaki krug se naziva ciklus odabira. Sa svakim ciklusom, sve smo bliže i bliže pronalaženju aptamera s najvećim afinitetom i specifičnošću za Tet - 213 stanice.
Procjena odabranih aptamera
Nakon nekoliko selekcijskih ciklusa imamo skupinu aptamera za koje smatramo da su dobri kandidati. Ali ne možemo samo pretpostaviti da su savršeni. Moramo ih ocijeniti.
Jedan od načina za procjenu aptamera je mjerenje njihovog afiniteta vezanja. Možemo koristiti tehnike poput površinske plazmonske rezonancije (SPR) ili izotermalne titracijske kalorimetrije (ITC). Ove metode nam mogu reći koliko se snažno aptameri vežu za Tet - 213 stanice.
Također moramo provjeriti specifičnost aptamera. Želimo biti sigurni da se vežu samo na Tet - 213 stanice, a ne na druge vrste stanica. To možemo učiniti testiranjem aptamera na različitim staničnim linijama.
Primjene aptamera odabranih iz Tet - 213 stanica
Aptameri koje odabiremo iz Tet - 213 stanica mogu imati širok raspon primjena. Na primjer, mogu se koristiti u dijagnostičkim testovima. Te aptamere možemo priključiti na senzore ili druge uređaje za otkrivanje. Kada su Tet - 213 stanice prisutne, aptameri će se vezati za njih, a senzor može otkriti vezanje, dajući nam signal.
Također se mogu koristiti u ciljanoj isporuci lijekova. Možemo spojiti lijekove na aptamere. Budući da aptameri imaju visok afinitet za Tet - 213 stanice, mogu prenositi lijekove izravno u te stanice, povećavajući učinkovitost liječenja i smanjujući nuspojave.
Ostala razmatranja
Tijekom procesa provjere aptamera moramo imati na umu još nekoliko stvari. Na primjer, kvaliteta Tet - 213 stanica je ključna. Ako stanice nisu zdrave ili su kontaminirane, to može utjecati na rezultate probira.
Također, uvjeti probira, kao što su temperatura, pH i sastav pufera, mogu utjecati na vezanje aptamera na stanice. Moramo optimizirati te uvjete kako bismo dobili najbolje rezultate.
Srodni peptidi
Ako ste zainteresirani za druge srodne peptide, također nudimoDinorfin A (1 - 13), amid, svinjskiiVezni segment fibronektina tipa III (1 - 25). Ovi peptidi imaju svoja jedinstvena svojstva i primjene u biološkim istraživanjima.
Zaključak
Izvođenje aptamer skrininga na Tet - 213 stanicama je uzbudljiv i nagrađivan proces. To može dovesti do otkrića aptamera s visokim afinitetom i specifičnošću za te stanice, koji se mogu koristiti u različitim primjenama. Kao dobavljač Tet - 213 stanica, ovdje smo da vas podržimo u vašem istraživanju. Ako ste zainteresirani za kupnju Tet - 213 stanica ili imate bilo kakvih pitanja o probiru aptamera, slobodno se obratite i započnite raspravu o nabavi. Radujemo se suradnji s vama!
Reference
- Ellington, AD i Szostak, JW (1990). In vitro selekcija RNA molekula koje vežu specifične ligande. Priroda, 346(6287), 818 - 822.
- Tuerk, C. i Gold, L. (1990). Sustavna evolucija liganada eksponencijalnim obogaćivanjem: ligandi RNA do DNA polimeraze bakteriofaga T4. Znanost, 249(4968), 505 - 510.
- Jayasena, SD (1999). Aptameri: klasa molekula u nastajanju koja konkurira antitijelima u dijagnostici. Clinical Chemistry, 45(9), 1628 - 1650.